《猫和老鼠》这部经典动画中，有着众多令人印象深刻的角色。

主要角色：

• 汤姆（Tom）：一只家猫，它最初名为“贾斯珀”，后经粉丝投票定名为汤姆。汤姆总是闪着机会主义的光芒，弓着腰在一旁等待机会出击杰瑞。它有一种强烈的欲望，总想抓住与它同居一室却难以抓住的老鼠杰瑞，但总是遭到失败。

• 杰瑞（Jerry）：与汤姆同居一室的小老鼠，机灵聪明，最初名为“金克斯”，后名为杰瑞。它总是用挑逗的眼神看着镜头，并且常常在不经意期间玩弄汤姆。因为杰瑞古灵精怪，所以经常能成功地戏弄汤姆且让他糗事百出，不过有时它也会被汤姆戏弄，时而在戏弄汤姆的同时也会享受到汤姆对它的关心，让它感动。

• 两只鞋太太（Two Shoes）：动画中汤姆猫的几种不同主人中最常出现的一位，经常处理两位主角在自己家中所制造的麻烦。由于视角问题，镜头只能看到她腰以下的部位。在动画中的设定大约40岁左右，身材粗壮的大妈形象，1952年之后不再登场。

• 泰菲（Tuffy）：一个由杰瑞收养的小灰鼠弃儿，个体娇小可爱，通常穿白色尿布，非常贪吃，会讲法语，无时无刻不在卖萌。它最初是杰瑞捡到的孤儿，后来成为杰瑞的侄子。

• 布奇（Butch）：一只肮脏的流浪猫，身份比较迷，有时是流浪猫，带领着流浪猫三人组（三猫组），有时是百万富翁。他总想捉到杰瑞，因此有时会与汤姆合作，但更多时候却与汤姆为敌（大多是成为情敌）。登场的时候经常唱的歌曲是绿野仙踪的插曲《在彩虹上》。

其他角色：

• 斯派克（Spike）：斗牛犬，比较凶，但面对自己孩子时格外温柔。它常因汤姆欺负杰瑞而教训汤姆，汤姆很害怕它。

• 泰克（Tyke）：斯派克的儿子，斯派克对他十分宠爱，他们戴着同样红色项圈。

• 图多盖洛（Toodles Galore）：白猫，颜值高且养尊处优，很受宠爱。汤姆非常喜欢她，汤姆的情敌布奇也会为她大打出手，她甚至迷倒了斯派克和杰瑞。

• 莱特宁（Lightning）：橙黄色的猫，是布奇所在的“流浪三猫”成员之一。

• 托普斯（Topsy）：灰色的小猫，也是“流浪三猫”成员。

• 马索尔（Muscles）：杰瑞的表哥，是一只力大无穷的老鼠，不但不怕猫咪，反而能暴打猫咪一顿。

• 梅林（Merlin）：杰瑞的二表哥。

• 佩克斯（Pecos）：杰瑞的舅舅。

此外，在剧情中还出现了很多小鸭子，如丑小鸭、小野鸭、小家鸭、刚出的小黄鸭、复活节小鸭子等，但未明确给它们命名。这些角色各具特色，共同构成了《猫和老鼠》这个充满欢乐和趣味的动画世界。

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